肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）疗法的原理和治疗流程

1. TIL疗法的原理

TIL疗法是指收集患者自身的肿瘤组织中的T淋巴细胞，分离能够特异性识别肿瘤细胞抗原的T淋巴细胞，其在体外IL-2的作用下被快速激活和扩增，然后回输到患者体内，最终达到肿瘤溶解和杀伤的效果。由于TIL来自肿瘤组织，因此具有较强的肿瘤归巢特性，可以精准靶向肿瘤细胞。TIL主要包括T细胞、巨噬细胞、NK细胞和树突状细胞。在TILs亚群中，CD4+Th1细胞、CD8+细胞毒性T细胞、NK细胞、巨噬细胞M1型和树突状细胞DC1型在免疫反应中发挥正调控作用，它们可以发挥良好的抗肿瘤细胞的免疫反应。与CAR-T和PD-1/PD-L1抗体等其他免疫疗法相比，TIL具有靶点多、靶向准确和浸润能力强、副作用小等优点，因此TIL可以弥补CAT-T疗法治疗实体瘤的不足，具有广阔的应用前景。

2.  TIL疗法的治疗流程

2.1 分离培养

将从患者体内取出的肿瘤组织切成小块，然后加入胶原酶、脱氧核糖核酸酶和透明质酸酶进一步消化肿瘤片段，并通过密度梯度离心或特异性细胞分选法（MACS/FACS）来分离TIL，虽然这种方法分析速度较快，但存在细胞受损的风险。研究表明，将肿瘤团块分割为1mm³，然后在IL-2培养基中培养两周，使TIL扩增并逐渐从组织块流出到培养基中进行获取，能减小细胞受损的风险。但需要每2-3天补充一次IL-2，因此这种方法需要大量的IL-2来激活和维持TIL的存活和扩增。另外，为了缩短体外培养周期，在快速扩增过程中，可以向TIL培养基中同时加入高剂量的IL-2、抗CD3抗体和PBMC滋养层细胞；除IL-2外，细胞因子（IL-15和IL-21）、共刺激分子、免疫检查点抑制剂等也可对TIL产生刺激扩增的作用。

2.2 清除残留肿瘤细胞

残留肿瘤细胞不适合在快速扩增法的培养条件下生长，因此不久后便会在培养过程中死亡；残留的肿瘤细胞也可通过Ficoll-Hypaque密度梯度离心的尼龙单丝网过滤去除。最后，为了确定残留肿瘤细胞的是否清除干净，可以运用实时定量聚合酶链反应、免疫组织化学、流式细胞术和原位荧光杂交等方法来检测肿瘤相关抗原，如S100、gp-100和MART-1。

2.3 回输

将扩增至1-1500亿的TIL通过静脉给药并辅以高剂量的IL-2回输到患者体内。这种新型的疗法不是像传统的简单地扩增回输，而是要确定患者病例中特定的突变。之后利用突变信息找到能够最有效瞄准这些突变的T细胞，最后提取出专门患者肿瘤中细胞突变的T细胞，这些细胞具有精准识别癌细胞的能力。

 

参考文献

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